摘要
为提升麦草秸秆碱法预处理水解液（简称碱预处理液）的可生化降解性能，本研究利用蛋清蛋白（Egg White Proteins，EWPs）热絮凝工艺脱除碱预处理液中的木质素，并与EWPs常温絮凝工艺，以及分别以氯化铁（FeCl3）和聚氯化铝（PAC）为絮凝剂的传统絮凝工艺进行比较。结果表明，在碱预处理液浓度（以CODCr计）为8 g/L时，经EWPs热絮凝工艺处理，碱预处理液中大分子胶体木质素（以浊度计）去除率达70.6%±2.2%，小分子可溶性木质素（以总酚计）去除率达20.7±1.4%，与EWPs常温絮凝、FeCl3及PAC絮凝工艺相比均有所提高。EWPs热絮凝脱除木质素的机理探究结果表明，高温会引发EWPs变性，导致其蛋白结构发生变化，促进EWPs通过疏水及氢键作用与木质素絮凝结合；在加热过程中，EWPs通过分子间氢键作用及巯基-二硫键转换反应，进一步与木质素形成大分子絮体，促进了碱预处理液中大分子木质素及其衍生物的絮聚脱除。
关键词
麦草秸秆富含木质纤维素，可通过生物炼制将其转化为生物燃料及生物基化学品，替代传统化石燃料及化学品。生物炼制过程主要通过酶及微生物将木质纤维素中的纤维素、半纤维素转变成单糖及低聚糖，再由微生物进一步转化成生物燃料及生物基化学品。木质纤维素中的木质素通过共价键与半纤维素结合，形成坚实的木质素鞘以包埋纤维素，使木质纤维素结构具有较高的顽抗性，阻碍了酶及微生物对纤维素、半纤维素的有效降
预处理可破坏木质纤维素的顽抗性结构，脱除木质素，以增加水解酶对原料中纤维素、半纤维素的可及性，进而提升酶水解效
目前，去除碱预处理液中木质素及其衍生物的方法主要包括物理法、化学法及生物法等。然而，上述方法在实际运行过程中存在设备成本高、操作复杂、能耗高等不
相比之下，生物絮凝剂具有原料可再生、絮体可降解等突出优势，受到行业及相关学者的广泛关注。在众多生物絮凝剂中，蛋白质在水净化和废水处理方面显示出巨大潜
目前，已有文献报道了EWPs作为生物絮凝剂，用于高岭土分散液和硅藻土悬浮液等模拟废水的澄
麦草秸秆，产自山东德州，预处理前将其剪切成3~5 cm长段。鸡蛋，购自当地市场，将蛋清分离并冷冻干燥，冻干粉末经筛分后得到粒径180~250 μm EWPs粉末，将其置于密封袋中，于4 ℃密封储存。氢氧化钠（NaOH）、氯化铁（FeCl3）、玫瑰红染料、聚氯化铝（PAC）、聚丙烯酰胺（PAM），均为分析纯，购于国药集团控股有限公司；1 μmol/L十六烷基三甲基溴化铵（Cetyltrimethylammonium bromide，CTAB）阳离子滴定液、磷酸盐缓冲液、乙酸/乙酸钠缓冲液，实验室自制；木质素，实验室提取；没食子酸标准品、铁氰化钾、磷酸、阿拉伯树胶，均购于天津市江天化工技术股份有限公司。
参照某工厂麦草秸秆高得率浆制浆工艺条件，对麦草秸秆进行碱法预处理，具体方法如下：将100 g绝干麦草秸秆置于密封袋中，NaOH添加量为麦草秸秆绝干质量的4%；以固液比1∶5加入蒸馏水，混匀后置于90 ℃恒温水浴中反应1 h。反应结束后，用350目浆袋进行固液分离，所得滤液即为碱预处理液，其主要成分及水质指标如
| 样品 | pH值 | 固含量/% | 浊度/NTU | CODCr/(mg· | 总酚/(g· |
|---|---|---|---|---|---|
| 碱预处理液 | 10.3 | 4.3 | 569 | 32159.1 | 3.27 |
参考赵
常温下分别以FeCl3、PAC为絮凝剂的传统絮凝反应（FeCl3、PAC絮凝工艺）及EWPs常温絮凝（EWPs-AT）工艺步骤如下：分别在碱预处理液中加入絮凝剂FeCl3、PAC和EWPs，在200 r/min搅拌转速下快速搅拌3 min，然后降低搅拌转速至50 r/min，慢速搅拌20 min，最后将水样于室温静置2 h。
EWPs热絮凝（EWPs-TC）工艺步骤如下：将EWPs加入碱预处理液中，依次经过上述相同的快速、慢速搅拌后，置于100 ℃水浴下反应10 min，再置于冰水混合物中冷却10 min；最后将水样置于室温下静置2 h。
静置结束后，取液面下方2 cm处澄清水样用于检测分析。
参考Ma
根据畅柯
根据Li
根据实验组与对照组吸光度差值，得到游离染液的吸光度，再根据玫瑰红染液标准曲线计算得到游离染料浓度。EWPs染料吸附量为染料初始添加量与反应终止时剩余量的差值。以EWPs溶液质量浓度为横坐标，以对应的游离染料量与EWPs染料吸附量的比值为纵坐标，拟合得到直线，斜率即为EWPs样品的表面疏水值（L/g）。
参考李
| （1） |
式中，Q表示样品表面电荷量，mmol/g；V1表示样品消耗的CTAB滴定液体积，mL；V2表示对照组消耗的CTAB滴定液体积，mL；M表示CTAB滴定液物质的量浓度，mmol/L；m表示样品质量，取0.03 g。
单糖（如葡萄糖、木糖）、呋喃化合物（如糠醛、羟甲基糠醛）及弱酸（如甲酸、乙酸）等化学组分的含量通过高效液相色谱（1200，安捷伦）进行分析。低聚糖分析前，依据美国国家可再生能源实验室（National Renewable Energy Laboratory，NREL
采用浊度分析仪（TL 2300，HACH）定量分析絮凝处理前后碱预处理液的浊度，用以表示大分子胶体木质素含量。分析前用去离子水校准仪器，每组实验设置3个平行样，结果取平均值。
采用Zetasizer 3000HSa纳米粒度及电位分析仪（Malvern Instruments，英国）测定絮凝处理所得澄清水样的Zeta电位。
采用普鲁士蓝法分析碱预处理液中的总酚含量。在离心管中加入0.1 mL稀释至一定倍数的絮凝处理所得澄清水样，加入1 mL 0.016 mol/L铁氰化钾溶液后，立即加入1 mL 0.02 mol/L酸性FeCl3溶液，摇匀并置于室温下反应15 min，随后加入5 mL稳定剂（由85%磷酸溶液和1%阿拉伯树胶溶液配制，均为质量分数），经漩涡振荡均匀分散后，使用紫外分光光度计测量700 nm处溶液的吸光度，最后根据没食子酸标准曲线，对溶液中的总酚含量进行定量分析，用以表示小分子可溶性木质素含量。
取絮凝处理前后的碱预处理液，经0.22 μm滤膜过滤后，分析其中的糖类化合物（如葡萄糖、葡聚糖、木糖、戊聚糖等）、浊度、总酚、呋喃化合物（如糠醛、羟甲基糠醛等）及弱酸（如甲酸、乙酸等）含量。根据絮凝处理前后样品各化学组分含量的差值，计算各化学组分去除率，如
| （2） |
式中，R表示去除率，%；Ci和Cf分别表示在絮凝处理前后的碱预处理液中，CODCr、糖类化合物、浊度、总酚、呋喃化合物及弱酸等各类指标的测量值。每组实验设置3个平行样，结果均平均值。
在碱预处理液中，木质素以大分子胶体木质素和小分子可溶性木质素2种形式存在，其中大分子胶体木质素是碱预处理液中浊度的主要来
为考察碱预处理液pH值对絮凝处理过程中木质素脱除的影响，控制碱预处理液浓度（以CODCr计，下同）为8 g/L、絮凝剂与碱预处理液中DL的质量比为1∶1，采用EWPs-TC工艺，在pH值=5.0~9.0范围内，考察pH值对木质素脱除的影响，并与EWPs-AT工艺及FeCl3、PAC絮凝工艺进行对比，结果如
图1 碱预处理液pH值对木质素脱除的影响
Fig. 1 Effect of alkali pretreatment hydrolysate’s pH value on lignin removal
从
为解释碱预处理液pH值对絮凝处理脱除木质素的影响，分析了不同pH值碱预处理液絮凝处理所得澄清水样的Zeta电位变化。如
在考察的pH值=5.0~9.0范围内，pH值对EWPs-TC和EWPs-AT工艺所得澄清水样的Zeta电位也具有一定影响（
絮凝剂与絮凝底物间的相互作用存在浓度依赖性。为考察絮凝剂用量对碱预处理液中木质素脱除的影响，控制碱预处理液pH值=7.0、碱预处理液浓度为8 g/L，在絮凝剂∶DL质量比=0.25∶1 ~ 4∶1范围内，考察EWPs-TC工艺下絮凝剂用量对碱预处理液中木质素脱除的影响，并与EWPs-AC工艺及PAC、FeCl3絮凝工艺进行对比，结果如
图2 絮凝剂∶DL质量比对木质素脱除的影响
Fig. 2 Effect of the mass ratio of flocculant to DL on lignin removal
如
如
水解液初始浓度不仅影响絮凝性能，同时也影响絮凝所需絮凝剂与絮凝底物的相对含量及盐离子浓
图3 碱预处理液浓度对木质素脱除的影响
Fig. 3 Effect of alkali pretreatment hydrolysate concentration on lignin removal
如
基于前文对絮凝工艺参数的系统优化，将絮凝工艺参数确定为絮凝剂∶DL质量比=1∶1、碱预处理液pH值=7.0、碱预处理液浓度8 g/L。在该絮凝工艺参数下，EWPs-TC工艺的CL和DL去除率分别为70.6%±2.2%及20.7%±1.4%，高于EWPs-AT工艺及FeCl3、PAC絮凝工艺。Shi
前文研究结果表明，EWPs-TC工艺可有效去除碱预处理液中的CL和DL，其去除率明显高于相同条件下的EWPs-AT工艺。目前已有研究主要从EWPs分子结构、表面基团及其与木质素的结合方式等方向，探究EWPs与木质素的作用机制。为探究EWPs-TC工艺在碱预处理液中脱除木质素的反应机理，当pH值=7.0时，分别对100 ℃热处理前后的EWPs样品进行结构及表面官能团对比分析，结果如
图4 反应温度对EWPs结构及表面性质的影响
Fig. 4 Effect of reaction temperature on the structure and surface properties of EWPs
（a） EWPs二级结构 （b） 电荷密度 （c） 表面电荷及自由巯基
| 样品 | α-螺旋 | β-折叠 | β-转角 | 无规卷曲 |
|---|---|---|---|---|
| EWPs | 32.7 | 17.7 | 21.9 | 29.6 |
| 热处理EWPs | 5.4 | 42.8 | 21.0 | 30.5 |
如
由
基于前文研究确定的絮凝工艺参数，以未经絮凝处理的空白碱预处理液为对照组，考察了碱预处理液经不同絮凝工艺处理后的性能指标，结果如
| 絮凝工艺 | 浊度/(NTU) | 总酚/(g· | CODCr/(mg· |
|---|---|---|---|
| 对照组 | 212 | 1.02 | 8396.3 |
| PAC | 128 | 0.83 | 7331.2 |
| FeCl3 | 64 | 0.82 | 7240.9 |
| EWPs-AT | 84 | 0.89 | 7989.5 |
| EWPs-TC | 56 | 0.84 | 7648.4 |
图5 不同絮凝工艺处理所得碱预处理液的BOD5、CODCr及可生化降解性能
Fig. 5 BOD5, CODCr and biodegradability of alkali pretreatment hydrolysate following different flocculation processes
如
本研究利用蛋清蛋白（EWPs）絮凝工艺脱除麦草秸秆碱法预处理液中的木质素，并探究其絮凝机理。
3.1 在pH值=7、EWPs絮凝剂与小分子可溶性木质素（以总酚计）质量比为1∶1、加热（100 ℃，加热时间10 min）、碱预处理液浓度（以CODCr计）为8 g/L条件下，EWPs对碱预处理液中大分子胶体木质素（以浊度计）去除率达70.6%±2.2%，与EWPs常温絮凝及分别以FeCl3、PAC为絮凝剂的传统絮凝工艺相比，去除率均有所提高。
3.2 在EWPs加热絮凝工艺脱除碱预处理液中木质素的过程中，热处理（100 ℃）会使EWPs变性，增加蛋白分子表面疏水性及氢键结合位点，促进EWPs与木质素的相互结合；同时，EWPs蛋白分子间通过氢键作用及巯基-二硫键转换反应，进一步与木质素交联形成大分子絮体，使得碱预处理液中大分子胶体木质素及其衍生物受重力沉降而絮聚脱除。
3.3 利用EWPs加热絮凝工艺脱除碱预处理液中木质素，可提升其可生化降解性能，以适用于后续生化处理。
综上所述，EWPs加热絮凝工艺为脱除碱预处理液中木质素、提升碱预处理液可生化性能提供了一条新路径。基于生物炼制的背景，本研究为开发碱预处理液中木质素脱除工艺及技术提供了新的选择，为完善球蛋白-木质素絮凝机理提供了数据支撑，还为制浆造纸工厂废水处理工艺升级，以及新型生物絮凝剂开发提供了新思路。后续研究可将EWPs加热絮凝工艺与生物制氢、产甲烷工艺相结合，综合评价EWPs加热絮凝工艺对生物能源生产过程的影响。
参 考 文 献
RAMACHANDRAN V， ISMAIL F S， NOOR M J M M， et al.Extraction and Intensive Conversion of Lignocellulose from Oil Palm Solid Waste into Lignin Monomer by the Combination of Hydrothermal Pretreatment and Biological Treatment［J］.Bioresource Technology Reports， DOI： 10.1016/j.biteb.2020.100456. [百度学术]
HERBURGER K， FRANKOVA L， PICMANOVA M， et al.Hetero-trans-β-glucanase Produces Cellulose-xyloglucan Covalent Bonds in the Cell Walls of Structural Plant Tissues and Is Stimulated by Expansin［J］.Molecular Plant， 2020， 13（7）： 1047-1062. [百度学术]
LEHUEDE L， HENRIQUEZ C， CARU C， et al.Xylan Extraction from Hardwoods by Alkaline Pretreatment for Xylooligosaccharide Production： A Detailed Fractionation Analysis［J］.Carbohydrate Polymers， DOI： https：//doi.org/10.1016/j.carbpol.2022.120381. [百度学术]
KIM J S， LEE Y Y， KIM T H.A Review on Alkaline Pretreatment Technology for Bioconversion of Lignocellulosic Biomass［J］.Bioresource Technology， 2016， 199： 42-48. [百度学术]
GOSHADROU A.Bioethanol Production from Cogongrass by Sequential Recycling of Black Liquor and Wastewater in a Mild-alkali Pretreatment［J］.Fuel， DOI： 10.1016/j.fuel.2019.116141. [百度学术]
LYU X， XIONG C， LI S， et al.Vacuum-assisted Alkaline Pretreatment as an Innovative Approach for Enhancing Fermentable Sugar Yield and Decreasing Inhibitor Production of Sugarcane Bagasse［J］.Bioresource Technology， 2017， 239： 402-411. [百度学术]
PEI P， ZHANG C， LI J， et al.Optimization of NaOH Pretreatment for Enhancement of Biogas Production of Banana Pseudo-stem Fiber Using Response Surface Methodology［J］.Bioresources， 2014， 9（3）： 5073-5087. [百度学术]
KLINKE H B， THOMSEN A B， AHRING B K.Inhibition of Ethanol-producing Yeast and Bacteria by Degradation Products Produced During Pre-treatment of Biomass［J］.Applied Microbiology and Biotechnology， 2004， 66（1）： 10-26. [百度学术]
KHAN M， LIU H， WANG J， et al.Inhibitory Effect of Phenolic Compounds and Plant Extracts on the Formation of Advance Glycation End Products： A Comprehensive Review［J］.Food Research International， DOI： 10.1016/j.foodres.2019.108933. [百度学术]
杨仁俊.木质纤维素高效预处理与β-葡萄糖苷酶固定化研究［D］.天津： 天津大学， 2018. [百度学术]
YANG R J.Highly Efficient Lignocellulose Pretreatment and β-glucosidase Immobilization［D］.Tianjin： Tianjin University， 2018. [百度学术]
蔡阳扬，陶秀萍，李同，等.天然高分子絮凝剂的制备及应用研究［J］.中国农业科技导报， 2023， 25（10）： 165-172. [百度学术]
CAI Y Y， TAO X P， LI T， et al.Preparation and Application of Natural Polymer Flocculants ［J］.Journal of Agricultural Science and Technology， 2023， 25（10）： 165-172. [百度学术]
高陆玺， 吕雪川， 张弛， 等.用于印染废水处理的改性絮凝剂合成及其脱色性能［J］.纺织学报， 2022， 43（7）： 121-128. [百度学术]
GAO L X， LYU X C， ZHANG C， et al.Synthesis and Decolorizing Performance of Modified Flocculant for Treating Dyeing Wastewater［J］.Journal of Textile Research， 2022， 43（7）： 121-128. [百度学术]
王瑞， 许婷婷， 张逸飞.絮凝剂在水处理中的应用与研究进展［J］.节能与环保， 2020（4）： 91-92. [百度学术]
WANG R， XU T T， ZHANG Y F.Application and Research Progress of Flocculant in Water Treatment［J］.Energy Conservation and Environmental Protection， 2020（4）： 91-92. [百度学术]
李华， 李新.絮凝法提高化工厂污泥脱水效果的实验研究［J］.化工矿物与加工， 2007（2）： 32-34. [百度学术]
LI H， LI X.Enhancement of Dehydration Properties for Chemical Sludge by Flocculation Process［J］.Industrial Minerals and Processing， 2007（2）： 32-34. [百度学术]
PAIXO R M， RECK I M， SILVA L， et al.Discolouration of Contaminated Water with Textile Dye Through a Combined Coagulation/Flocculation and Membrane Separation Process with Different Natural Coagulants Extracted from Moringa OleiferaLam.Seeds［J］.The Canadian Journal of Chemical Engineering， DOI： 10.1002/cjce.23932. [百度学术]
李崇裔， 谢桂容， 廖红光， 等.皮革胶原基絮凝剂对印染废水的脱色性能［J］.印染， 2022， 48（12）： 52-57. [百度学术]
LI C Y， XIE G R， LIAO H G， et al.Decolorization Property of Dyeing Effluents with Leather Collagen-based Flocculants［J］.China Dyeing and Finishing， 2022， 48（12）： 52-57. [百度学术]
LAMBRECHT M A， DELEU L J， ROMBOUTS I， et al.Heat-induced Network Formation Between Proteins of Different Sources in Model Systems， Wheat-based Noodles and Pound Cakes［J］.Food Hydrocolloids， 2017， 79：352-370. [百度学术]
宋英石.原花青素调控面筋蛋白聚集机制的研究［D］.天津： 天津科技大学， 2018. [百度学术]
SONG Y S.Mechanism of Proanthocyanidins Regulating the Aggregation of Gluten Proteins［D］.Tianjin： Tianjin University of Science and Technology， 2018. [百度学术]
KAARMUKHILNILAVAN R S， SELVAM A， WONG J W C， et al.C
SEKI H， SUZUKI A.Flocculation of Diatomite by Methylated Egg Albumin［J］.Journal of Colloid and Interface Science， 2003， 263（1）： 42-46． [百度学术]
赵敏， 陈妍， 王高升，等. 蛋清蛋白絮凝处理脱除玉米秸秆水解液中的木质素衍生物［J］. 中国造纸学报， 2024， 39（1）： 146-154. [百度学术]
ZHAO M， CHEN Y， WANG G S， et al. Study on the Removal of Lignin Derivatives from Corn Stalk Hydrolysate via Flocculation Treatment by Egg White Protein［J］. Transactions of China Pulp and Paper， 2024， 39（1）： 146-154.. [百度学术]
MA Z， CHI Y， ZHANG H， et al.Inhibiting Effect of Dry Heat on the Heat-induced Aggregation of Egg White Protein［J］.Food Chemistry， DOI： 10.1016/j.foodchem.2022.132850. [百度学术]
畅柯飞.热处理对蛋清蛋白聚集行为及界面性质调控作用机制研究［D］.长春： 吉林大学， 2022. [百度学术]
CHANG K F.Effects of Heat Treatment on the Aggregation Behavior and Interface Properties of Egg White Protein［D］.Changchun： Jilin University， 2022. [百度学术]
LI Y， QI B， LUO J， et al.Effect of Alkali Lignins with Different Molecular Weights from Alkali Pretreated Rice Straw Hydrolyzate on Enzymatic Hydrolysis［J］.Bioresource Technology， 2016， 200： 272-278. [百度学术]
李云.秸秆预处理水解液对酶解的影响及资源化利用研究［D］.北京： 中国科学院研究生院（过程工程研究所）， 2017. [百度学术]
LI Y.Effect of Rice Straw Prehydrolysate on Enzymatic Cellulose Hydrolysis and Its Resource Utilization［D］.Beijing： The University of Chinese Academy of Sciences， 2017. [百度学术]
GILCREAS F W. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater［J］. University of Exeter， DOI： 10.1007/BF02996984. [百度学术]
SLUITER A D， HAMES B R， RUIZ R. Determination of Sugars， Byproducts， and Degradation Products in Liquid Fraction Process Samples［M］. Golden， Colo.： National Renewable Energy Laboratory， 2006. [百度学术]
LI Z Q， QIU C L， GAO J J， et al.Improving Lignin Removal from Pre-hydrolysis Liquor by Horseradish Peroxidase-catalyzed Polymerization［J］.Separation and Purification Technology， DOI： 10.1016/j.seppur.2018.11.038. [百度学术]
ZHAO C， ZHOU J， YAN Y， et al.Application of Coagulation/Flocculation in Oily Wastewater Treatment： A Review［J］.Science of the Total Environment， DOI： 10.1016/j.scitotenv.2020.142795. [百度学术]
RAHIKAINEN J L， EVANS J D， MIKANDER S， et al.Cellulase-lignin Interactions—The Role of Carbohydrate-binding Module and pH in Non-productive Binding［J］.Enzyme and Microbial Technology， 2013， 53（5）： 315-321. [百度学术]
刘子龙.制革脱铬废水多级膜处理及无机盐回收研究［D］.天津： 河北工业大学， 2022. [百度学术]
LIU Z L.Study on Multi-stage Membrane Treatment and Inorganic Salt Recovery of Tannery Chromium Removal Wastewater ［D］.Tianjin： Hebei University of Technology， 2022. [百度学术]
NORDMARK B A， PRZYBYCIEN T M， TILTON R D.Comparative Coagulation Performance Study of Moringa Oleifera Cationic Protein Fractions with Varying Water Hardness［J］.Journal of Environmental Chemical Engineering， 2016， 4：4690-4698. [百度学术]
SHEN X， GAO B， GUO K， et al.Characterization and Influence of Floc under Different Coagulation Systems on Ultrafiltration Membrane Fouling［J］.Chemosphere， DOI： 10.1016/j.chemosphere.2019.124659. [百度学术]
WANG H T， QI J， KELLER A A， et al.Effects of pH， Ionic Strength and Humic Acid on the Removal of TiO2 Nanoparticles from Aqueous Phase by Coagulation［J］.Colloids and Surfaces A： Physicochemical and Engineering Aspects， 2014.450： 161-165. [百度学术]
CHEN K L， ELIMELECH M.Aggregation and Deposition Kinetics of Fullerene （C60） Nanoparticles［J］.Langmuir， 2006， 22（26）： 10994-11001. [百度学术]
SHIH Y H， ZHUANG C M， TSO C P， et al.The Effect of Electrolytes on the Aggregation Kinetics of Titanium Dioxide Nanoparticle Aggregates［J］.Journal of Nanoparticle Research， 2012， 14（8）： 1-11. [百度学术]
SHI H， FATEHI P， XIAO H， et al.A Combined Acidification/PEO Flocculation Process to Improve the Lignin Removal from the Pre-hydrolysis Liquor of Kraft-based Dissolving Pulp Production Process［J］.Bioresource Technology， 2011， 102（8）： 5177-5182. [百度学术]
王永梅， 马晓军.热处理辅助木瓜蛋白酶改善蛋清蛋白的起泡特性［J］.食品与生物技术学报， 2018， 37（4）： 392-399. [百度学术]
WANG Y M， MA X J.Study on Modification of Egg White Protein with Heat-assisted Enzymatic Hydrolysis Methods［J］.Journal of Food Science and Biotechnology， 2018， 37（4）： 392-399. [百度学术]
CHOI S M， MA C Y.Structural Characterization of Globulin from Common Buckwheat （Fagopyrum Esculentum Moench） Using Circular Dichroism and Raman Spectroscopy［J］.Food Chemistry， 2007， 102（1）： 150-160. [百度学术]
GUO W B， ZHAO Y， YAO Y， et al.Relationship Between Protein Structure Changes and in Vitro Digestion of Preserved Egg White during Pickling［J］.International Journal of Biological Macromolecules， 2019， 138： 116-124. [百度学术]
TAN J E， DENG C Y， YAO Y， et al.Effects of Different Copper Salts on the Physicochemical Properties， Microstructure and Intermolecular Interactions of Preserved Egg Ehite［J］.Food Chemistry， DOI： 10.1016/j.foodchem.2022.134756. [百度学术]
CHEN Y A， Yan Z， QIN Y， et al.Evaluation of the Action of Tween 20 Non-ionic Surfactant During Enzymatic Hydrolysis of Lignocellulose： Pretreatment， Hydrolysis Conditions and Lignin Structure［J］.Bioresource Technology， 2018， 269： 329-338. [百度学术]
HUANG C， JIANG X， SHEN X， et al.Lignin-enzyme Interaction： A Roadblock for Efficient Enzymatic Hydrolysis of Lignocellulosics［J］.Renewable and Sustainable Energy Reviews， DOI： 10.1016/j.rser.2021.111822. [百度学术]
BEVERIDGE T， TOMA S J， NAKAI S.Determination of SH- and SS-groups in Some Food Proteins Using Ellman’s Reagent［J］.Journal of Food Science， 1974， 39： 49-51. [百度学术]
HSU Y C， YANG H C， CHEN J H.The Enhancement of the Biodegradability of Phenolic Solution Using Preozonation Based on High Ozone Utilization —Science Direct［J］.Chemosphere， 2004， 56（2）： 149-158. [百度学术]
JAAFARZADEH N， GHANBARI F， ALVANDI M.Integration of Coagulation and Electro-activated HSO